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细胞因子试剂盒的检测也是很有讲究的
2023-02-25 浏览次数：357
细胞因子试剂盒主要用于科研方面，不用于临床诊断，可以用于检测各种指标。做快速检测时，待检测的样品数越多，出现加错的概率也就越大，特别容易出错的是在酶联偶合物（conjugate）与样品液或标液混合的阶段，因为这时使用的是单道枪。其实解决的方法比较简单，我们只要把操作上的顺序加以调换，即先把待测液或标液加入稀释孔中，再加入酶联偶合物就不会出现错误了。而且这两个顺序交还对结果也没有影响，因为这一步的主要目的是让两种液体充分混合。
细胞因子试剂盒从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。灵敏度有二层含义，为试剂检出被检物质的低量的能力；为试剂对大量样品中阳性检出的能力。特异性常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应，使测定结果升高，可能导致假阳性，所以交叉反应是评价其质量的关键指标。精密度一般指其批内CV%，其值应小于15%；定量试剂应同时考察线性范围。准确度：通过添加回收实验进行评价。
细胞因子试剂盒在检测前的工作：
1、请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。
2、将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象，可用40℃水浴微加热使结晶*溶解后再配制洗涤液（加热温度不要超过50℃，使用时洗涤液应为室温）。当日使用。
3、标准品:于10000×g离心1分钟，加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中，旋紧管盖，静置10分钟，上下颠倒数次，待其充分溶解后，用移液器将其轻轻混匀（浓度为8000pg/mL）。然后根据需要进行倍比稀释（注：不要直接在反应孔中进行倍比稀释）。建议配制成以下浓度：按照稀释方法图例标准品&样品稀释液直接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品：取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中，混匀即可，其余浓度依此类推。
4、生物素化抗体工作液：实验前计算当次实验所需用量（以100μL/孔计），实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟，以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。
5、酶结合物工作液：实验前计算当次实验所需用量（以100μL/孔计），实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟，以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。
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