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激素ELISA试剂盒如何鉴定抗体
2018-08-13 浏览次数：1969
无论做什么都是熟能生巧，ELISA实验自然也是如此，其中的操作技术是需要充分的文字了解与反复实践的。的试剂，良好状态的仪器，排除各种影响因素的干扰和正确操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。本文讲一讲激素ELISA试剂盒如何鉴定抗体。
1.抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高，它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线，计算各自的结合率，求出各自在IC50时的浓度，并按下列公式计算交叉反应率。交叉反应率=IC50时抗原浓度(Y)/IC50近似抗原物质的浓度(Z)X100%。如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管，而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时，表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0，即该血清的特异性较好。
2. 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于治疗，制备抗体的目的都是要求较价。不同的抗原制备的抗体，要求的效价不一。鉴定效价的方法很多，包括有试管凝集反应、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法，以资比较。如制备抗抗体的效价，一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
3. 抗体的亲和力鉴定： 抗体的亲和力是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小、抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键、疏水键、侧链相反电荷基因的库仑力、范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示，K的单位是L/mol，通常K的范围在108～1010/mol，也有多达1014/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选，确定抗体的用途，验证抗体的均一性等均有重要意义。
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