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细胞因子试剂盒在使用前需遵守以下事项

2022-03-26 浏览次数:643

 
  细胞因子试剂盒从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。灵敏度有二层含义,为试剂检出被检物质的低量的能力;为试剂对大量样品中阳性检出的能力。特异性常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应,使测定结果升高,可能导致假阳性,所以交叉反应是评价其质量的关键指标。精密度一般指其批内CV%,其值应小于15%;定量试剂应同时考察线性范围。准确度:通过添加回收实验进行评价。
  细胞因子试剂盒主要用于科研方面,不用于临床诊断,可以用于检测各种指标。做快速检测时,待检测的样品数越多,出现加错的概率也就越大,特别容易出错的是在酶联偶合物(conjugate)与样品液或标液混合的阶段,因为这时使用的是单道枪。其实解决的方法比较简单,我们只要把操作上的顺序加以调换,即先把待测液或标液加入稀释孔中,再加入酶联偶合物就不会出现错误了。而且这两个顺序交还对结果也没有影响,因为这一步的主要目的是让两种液体充分混合。
  细胞因子试剂盒在使用前需遵守以下事项:
  1、请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
  2、将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,可用40℃水浴微加热使结晶*溶解后再配制洗涤液(加热温度不要超过50℃,使用时洗涤液应为室温)。当日使用。
  3、标准品:于10000×g离心1分钟,加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中,旋紧管盖,静置10分钟,上下颠倒数次,待其充分溶解后,用移液器将其轻轻混匀(浓度为8000pg/mL)。然后根据需要进行倍比稀释(注:不要直接在反应孔中进行倍比稀释)。建议配制成以下浓度:按照稀释方法图例标准品&样品稀释液直接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中,混匀即可,其余浓度依此类推。
  4、生物素化抗体工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。
  5、酶结合物工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。

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